Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Набор для экстракции из геля предназначен для выделения фрагментов ДНК из агарозного геля после электрофоретического разделения. С помощью набора можно очистить фрагменты ДНК от 25 до 20 тыс. п.н. с выходом до 95%. Ёмкость колонок GeneJET - до 25 мкг ДНК, выделяемой из 1 г агарозного геля. Выделеннная ДНК пригодна для рестрикции, лигирования, секвенирования, мечения и т.д.

Условия хранения: комнатная температура.

Выделение геномной ДНК из лейкоцитов цельной крови для последующего анализа выделенной ДНК методом ПЦР; метод основан на центрифугировании; для применения только in vitro; рассчитан на выделение ДНК из 100 анализируемых образцов. Неокрашенный.

Мини колонки Aurum Plasmid Mini для выделения ДНК Выделенная плазмидная ДНК подходит для применения в высокочувствительных методах анализа: секвенирование, лигирование, рестрикционный анализ, субклонирование, трансфекции и ПЦР; выделение методом адсорбционной хроматографии; высокий выход продукта; вакуумное выделение или выделение центрифугированием; время выделения - 10 минут; выход плазмидной ДНК – более 20 мкг; набор содержит все необходимые компоненты.

Анализируемый материал – соскобы, мазки, 20-30 мкл спермы или сока простаты, осадок мочи или др.взвесей; метод основан на лизисе клеток с последующей абсорбцией ДНК на спец. сорбенте; рассчитан на выделение ДНК из 100 анализируемых образцов.

Исследуемым материалом для анализа является плазма или сыворотка из цельной венозной крови; для дальнейшей детекции наличия ДНК-вирусов методом ПЦР; метод основан на центрифугировании; рассчитан на выделение ДНК из 100 анализируемых образцов.

Выделение ДНК из различных источников: биоптатов, плазмы крови, соскобов, мокроты и пр, в том числе, содержащих большое количество ингибирующих примесей; метод основан на лизисе клеток с последующей сорбцией на сорбенте/носителе (бусы, стеклянное «молоко»); при использовании данного метода возможны потери ДНК вследствие необратимого осаждения на сорбенте; возможна перекрестная контаминация в случае несоблюдения технологии выделения. - дополнительный буфер.

Выделение ДНК из цельной крови, плазмы и другого клинического материала (клеточный осадок мочи, слюна, ликвор, мокрота, биоптаты, бронхо-альвеолярный лаваж и промывные воды бронхов, фекалии), объем материала - 0,1 мл; на 100 проб, включая контроли.

Набор GED на основе спин-колонок используется для быстрой элюции ДНК из фрагментов агарозного геля весом до 500 мг. Набор позволяет выделять до 25 мкг ДНК размером от 50 п.н. до 15 т. п. н., также происходит очистка от бромистого этидия. Выход ДНК – до 90%. Выделенная ДНК пригодна для всех стандартных молекулярно-биологических процедур (ПЦР, секвенирование, лигирование и т.д.), спектральные характеристики препаратов A260/280=1,8-2,0. Длительность процедуры – 15 минут. Условия хранения – при комнатной температуре. Срок годности – 12 месяцев. В состав набора входит: буфер M - 35 мл; буфер W - 8 мл; буфер E - 5 мл; колонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 80% этанола. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Элюция ДНК проводится буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%). Буфер M содержит индикатор кислотности, при оптимальном pH индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера М, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл NaAc (3,0 М pH 5,0). Контроль качества ДНК, выделенной с помощью набора GED Наборы тестируются путем выделения фрагмента ДНК размером 50 п. н. из 2% агарозного геля и 15 т. п. н. из 1% агарозного геля в соответствии с протоколом. Качество полученных препаратов ДНК оценивается при помощи спектрофотометрии, гель-электрофореза и гидролиза рестриктазами.

QIAamp DNA Mini Kit Выделение и очистка общей ДНК (до 50 кБ) из цельной и сухой крови, плазмы, сыворотки, лейкоцитов, лимфоцитов, тельных жидкостей, культур клеток, мазков, образцов ткани; основано на процедуре лизиса клеточных стенок с последующим связыванием ДНК с мембраной (силикой) в миницентрифужной колонке при соответствующей ионной силе и рН; набор содержит протеиназу; для ПЦР, саузерн-блоттинга и др. объём образца — до 200 мкл/25 мг/5x106 клеток; время выделения — 20 минут.

Выделение тотальной ДНК из фиксированных спиртом эпителиальных клеток (цервикальных соскобов), взятых в транспортно-фиксирующую среду для жидкостной цитологии; основано на растворении слизи цервикального канала муколизином, отмывке клеток от спирта с помощью PBS, высвобождении ДНК из клеток путем их лизиса детергентом и деградации белков протеазой; освобожденная от белков ДНК очищается сорбцией на силикагеле; на 100 проб фиксированных клеток объемом 2 - 5 мл.