Выделение и очистка нуклеиновых кислот

Набор RCD на основе спин-микроколонок предназначены для быстрой очистки ДНК после ферментативных реакций (рестрикция, лигирование, ПЦР и пр.). В ходе очистки удаляются одноцепочечные олигонулеотиды, dNTP, соли, ферменты. Набор позволяет выделять фрагменты ДНК размером от 20 п.н. до 15 т. п. н. Выход ДНК – до 95%. Выделенная ДНК пригодна для всех стандартных молекулярно-биологических процедур (ПЦР, секвенирование, лигирование и т.д.), спектральные характеристики препаратов A260/280=1,8-2,0. Емкость микроколонки - до 25 мкг ДНК. Время выделения – 7 минут, условия хранения – при комнатной температуре. Срок годности – 12 месяцев. В состав набора входит: буфер Y - 30 мл; буфер W - 8 мл; буфер E - 5 мл; микроколонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 80% этанола. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Элюция ДНК проводится буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%). Буфер Y содержит индикатор кислотности, при оптимальном pH индикатор имеет желтый цвет. Если после добавления к образцу Буфера Y, цвет индикатора отличается от желтого, к смеси необходимо добавить 10 мкл NaAc (3,0 М pH 5,0). Контроль качества ДНК, выделенной с помощью набора RCD Наборы тестируются путем выделения фрагментов ДНК (50 п.н. и 7 т.п.н.) в соответствии с протоколом. Качество полученных препаратов ДНК оценивается спектрофотометрически, при помощи гель-электрофореза, гидролиза рестриктазами и последующего молекулярного клонирования.

Набор GBD используется для выделения геномной ДНК из 1-3 мл бактериальной культуры; принцип работы - связывание ДНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять бактериальную геномную ДНК, пригодную для любых молекулярно-биологических реакций; спектральные характеристики выделенной ДНК - А(260/280) = 1,8 – 2,0; время выделения – 1 час; условия хранения – при комнатной температуре; срок годности - до 12 месяцев. В состав набора входит: буфер 1 – 5 мл; буфер 2 – 10 мл; раствор для сорбции – 20 мл; раствор для промывки 1 - 20 мл; раствор для промывки 2 (концентрат) - 15 мл; лизоцим, протеиназа К – 10 мг; раствор РНКазы А – 100 мкл; колонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы GBD на основе колонок БиоСилика позволяют выделять бактериальную геномную ДНК из 1-3 мл бактериальных культур. Размер фрагментов ДНК – до 25 т.п.н. Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Препараты ДНК, выделенные наборами GBD, могут быть использованы в стандартных молекулярно-биологических процедурах. Емкость колонок БиоСилика по ДНК – 25 мкг. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять свободную от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Наиболее эффективно связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 70% этанола. Элюция проводится деионизованной водой, либо буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 100 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%).

Наборы предназначены для выделения геномной ДНК из зелёных частей растений. Параллельно с геномной ДНК растения происходит выделение геномной бактериальной и вирусной ДНК, что удобно при анализе инфицированности растения. Очистка ДНК на микроколонках diaGene начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли с последующей отмывкой связанной ДНК от примесей и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Сорбент позволяет выделять до 15 мкг геномной ДНК. Все реагенты хранятся при комнатной температуре (+15-25 °С).

Набор на основе колонок BPD используется для выделения ДНК из плазмы крови; принцип работы - связывание ДНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять до 25 мкг ДНК, пригодной для любых молекулярно-биологических реакций; объем образца – 100-200 мкл; спектральные характеристики качества А(260/280) = 1,8 – 2,0; время выделения - 20 мин; при выделении не используется протеиназа К; условия хранения набора - при комнатной температуре; срок годности - до 12 месяцев. В состав набора входит: раствор для сорбции – 20 мл; раствор для промывки 1 - 20 мл; раствор для промывки 2 (концентрат) - 15 мл; колонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы на основе колонок БиоСилика для выделения ДНК из плазмы крови позволяют выделять до 80% от содержащейся в образце ДНК. Объем образца – 100-200 мкл (можно увеличить объем, увеличив соответственно объемы растворов). Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Препараты ДНК, выделенные наборами BPD, могут быть использованы в стандартных молекулярно-биологических процедурах, таких как ПЦР в режиме реального времени и т.п. Сорбционная емкость колонок БиоСилика по ДНК – 25 мкг. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять свободную от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Наиболее эффективно связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 70% этанола. Элюция проводится деионизованной водой, либо буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюирующего буфера - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%). Максимальный объем элюирующего буфера – 100 мкл.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

Данный набор предназначен для выделения суммарной РНК из различных биологических образцов - культур животных клеток, животных тканей, человеческих клеток крови, бактерий и дрожжей.

С помощью набора GeneJET можно получить препарат чистой РНК (А260/280 > 1.9) с длиной фрагментов не менее 200 нуклеотидов. Полученная РНК пригодна для молекулярно-биологических экспериментов, таких, как обратная транскрипция, ОТ-ПЦР, ОТ-количественная ПЦР и гибридизация.

Условия хранения: комнатная температура

Набор PLD используется для выделения плазмидной ДНК из 3-5 мл бактериальной культуры; принцип работы - связывание ДНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять до 25 мкг ДНК, пригодной для любых молекулярно-биологических реакций (ПЦР, секвенирование, лигирование и т.д.) со спектральными характеристиками качества А (260/280) = 1,8 – 2,0; время выделения - 15 мин; условия хранения - при комнатной температуре (раствор РНКазы А - при -20 оС); срок годности - до 12 месяцев. В состав набора входит: буфер R - 12 мл; буфер L - 12 мл; буфер N - 12 мл; буфер W - 8 мл; буфер E - 5 мл; РНКаза А - 120 мкл; микроколонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы на основе колонок БиоСилика применяются для выделения плазмид из бактериальных культур, очистки ДНК после ферментативных реакций (ПЦР, рестрикция, дефосфорилирование, лигирование, кинирование, обратная транскрипция и др.) и для элюции фрагментов ДНК из агарозного геля. Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять до 25 мкг свободной от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 80% этанола. Элюция ДНК проводится буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее, чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%).

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

С помощью данного набора можно выделить геномную ДНК (длина фрагментов - свыше 30 тыс. п.н.) из культур животных клеток, образцов животных тканей, цельной крови, бактерий и дрожжей.

Выделенная ДНК пригодна для большинства молекулярно-биологических экспериментов - ПЦР, гибридизации, рестрикции и др.

Условия хранения: комнатная температура

Набор CCD используется для выделения ДНК из культур клеток; объем образца – до 1 млн клеток; принцип работы - связывание ДНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять до 7 мкг ДНК, пригодной для любых молекулярно-биологических реакций; спектральные характеристики выделенной ДНК - А(260/280) = 1,8 – 2,0; время выделения - 20 мин; условия хранения набора - при комнатной температуре; срок годности - 12 месяцев. В состав набора входит: лизис-буфер – 15 мл; буфер BB1 (концентрат) - 10 мл; буфер WB1 (концентрат) - 30 мл; раствор для промывки 2 (концентрат) - 15 мл; РНКаза А; Протеиназа К; колонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы на основе колонок БиоСилика для выделения ДНК из культур клеток позволяют выделять до 7 мкг ДНК из образцов, содержащих до 1 млн эукариотических клеток (количество клеток можно увеличить соответственно с объемом растворов). Очистка ДНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания ДНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной ДНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата ДНК. Препараты ДНК, выделенные наборами ССD, могут быть использованы в стандартных молекулярно-биологических процедурах. Сорбционная емкость колонок БиоСилика – до 25 мкг ДНК. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять свободную от примесей ДНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата ДНК. Эффективность сорбции ДНК зависит от значения pH. Наиболее эффективно связывание ДНК с сорбентом происходит при pH < 7,5, а элюция ДНК - при pH > 7,5. Отмывка ДНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 70% этанола. Элюция проводится деионизованной водой, либо буфером, содержащим 10 мМ Трис, рН = 8,5. Оптимальный объем элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%). Максимальный объем элюции – 100 мкл.

Наборы серии GeneJET предназначены для выделения ДНК и РНК из различных биологических источников с использованием технологии спин-колонок. Сорбция происходит на мембране из диоксида кремния.

При выделении плазмидной ДНК из бактериальной культуры с помощью набора GeneJET сперва происходит лизис бактерий, а потом осветлённый лизат наносится на колонку. При этом происходит селективое связывание плазмидной ДНК, затем отмывка от примесей и элюция чистого препарата.

Ёмкость спин-колонок GeneJET - до 20 мкг плазмидной ДНК. Очищенная ДНК пригодна для молекулярно-биологических экспериментов - ПЦР, рестрикции, трансформации и секвенирования.

Условия хранения: комнатная температура.

Набор CCR используется для выделения РНК из культур клеток; объем образца – до 1 млн клеток; принцип работы - связывание РНК с сорбентом на колонках; набор позволяет выделять РНК, пригодную для любых молекулярно-биологических реакций; время выделения - 20 мин; условия хранения набора – растворы при 4-8 ºС, остальные компоненты - при комнатной температуре; срок годности - до 12 месяцев. В состав набора входит:: лизис-буфер – 15 мл; буфер BB1 (концентрат) - 10 мл; буфер WB1 (концентрат) - 30 мл; раствор для промывки 2 (концентрат) - 15 мл; колонки - 50 шт; пробирки объемом 2 мл - 50 шт. Принцип действия Наборы на основе колонок БиоСилика для выделения РНК из культур клеток позволяют выделять РНК из образцов, содержащих до 1 млн эукариотических клеток (количество клеток можно увеличить соответственно с объемом растворов). Очистка РНК на колонках БиоСилика начинается с избирательного связывания РНК с сорбентом в присутствии хаотропной соли, последующей отмывки связанной РНК от примесей, и заканчивается элюцией чистого препарата РНК. Препараты РНК, выделенные наборами ССR, могут быть использованы в стандартных молекулярно-биологических процедурах. Сорбент, изготовленный по запатентованной технологии, позволяет выделять свободную от примесей РНК. Растворы, входящие в состав наборов, обеспечивают высокий выход и чистоту конечного препарата. Отмывка РНК, связанной с колонкой, происходит в присутствии 70% этанола. Элюция проводится деионизованной водой, обработанной DEPC. Оптимальный объем раствора для элюции - 50 мкл. Элюция меньшим объемом (не рекомендуется элюировать менее чем 30 мкл) повышает концентрацию ДНК в конечном препарате, вместе с тем увеличиваются потери (выход 60 - 70%). Максимальный объем элюции – 100 мкл.