АТФ (аденозин-5’-трифосфат) - высоко стабильный нуклеотид. Предлагается в виде водного 100 мМ раствора, титрованного NaOH до рН 7.3-7.5. Чистота не менее 99%. Стабилен при -20оС в течение нескольких лет, выдерживает многократное замораживание-оттаивание.
Области применения:
Транскрипция in vitro; синтез РНК, в том числе микроРНК; лигирование; фосфорилирование.Условия хранения: -20оС
от 0
ДНК-лигаза Т4 в низкой концентрации, 1 ед/мкл
ДНК-лигаза Т4 катализирует образование фосфодиэфирной связи между 5’-фосфорилированным и 3’-гидроксилированным концами двух фрагментов двойной цепи ДНК или РНК. Фермент восстанавливает однонитевые разрывы в двойных цепях ДНК, РНК или гибридов ДНК/РНК. ДНК-лигаза сшивает как липкие, так и тупые концы, но не однонитевые нуклеиновые кислоты.
В качестве кофермента требуется наличие АТФ.
ДНК-лигаза Т4 от Thermo Scientific активна в рестриктазных буферах, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.
Реакция лигирования липких концов происходит в течение 10 минут при комнатной температуре.
Для лигирования тупых концов в комплект входит раствор полиэтиленгликоля.
Области применения:
Клонирование фрагментов ДНК или ПЦР-фрагментов в вектор после рестрикции;пришивка олигонуклеотидных линкеров и адапторов к ДНК; ;репарация 1-цепочечных разрывов в двухцепочечных молекулах нуклеиновых кислот;циркуляризация линейной ДНК.ДНК-лигаза Т4 Thermo Scientific комплекутется 10-кратным лигазным буфером и 50% растворов ПЭГ.
Активность ДНК-лигазы может измеряться в единицах лигирования липких концов (лигирование 50% HindIII-фрагментов ДНК фага в течение 30 минут) или в единицах Вейсса (каталитическое превращение 1 нмоль дифосфата в течение 20 минут). 1 единица Вейса равна 200 единицам лигирования липких концов.
Важно!
1) Связывание лигазы с ДНК може приводить к смещению полос в агарозном геле. Во избежание подобного смещения рекомендуется добавлять к электрофорезным образцам буфер для нанесения с SDS и инкубировать образцы в течение 10 минут при +65оС, а затем охладить во льду.
2) При электротрансформации лигазной смеси необходимо произвести очистку ДНК от фермента (на спин-колонках или фенол-хлороформной экстракцией)
Условия хранения: -20оС
от 0
от 0
ДНК-полимераза Т4 - это матрица-зависимая ДНК-полимераза, которая катализирует синтез цепи ДНК в направлении 5’-->3’ с помощью праймера. Фермент обладает 3’-5’, но не 5’-3’ экзонуклеазной активностью.
3’-5’экзонуклеазная активность преобладает в отношении 1-цепочечной ДНК (по сравнению с 2-цепочечной) и в 200 раз выше, чем экзонуклеазная активность ДНК-полимеразы I E.coliи фрагмента Кленова.
Активна во всех рестриктазных буферах Thermo Scientific, а также в в ПЦР-буфере, лигазном буфере и буфере для обратной транскрипции.
Область применения:
Устранение липких концов фрагментов ДНК - достройка выступающих 5’ и отщепление выступающих 3’ ; синтез меченых ДНК с помощью реакции замещения; сайт-специфический мутагенез с помощью олигонуклеотидов;лигаза-независимое клонирование.Условия хранения: -20оС
от 0
X-gal (5-бром-4-хлор-3-индолил-бета-D-галактопиранозид)
В первую очередь, X-gal применяется для анализа активности репортерного гена lacZ, кодирующего бета-галактозидазу, в клетках бактерий, дрожжей и животных. В растениях в качестве репортерного гена, маркером активности которого также является X-gal, используется ген GUS.
Также X-gal используется совместно с конъюгатами гликозидаз в качестве при иммуногистохимии и ELISA.Наконец, поскольку бета-галактозидаза сохраняет свою активность в фиксированных клетках и тканях, X-gal используется для детекции её активности.
от 0
Водный раствор хлорида магния, отфильтрованный через мембрану 0.22 мкм. Предназначен для оптимизации условий ПЦР. Совместим со всеми полимеразами Thermo Scientific -, , и др. Также может использоваться в качестве ко-фактора в других ферментативных реакциях.
Не содержит эндо- и эндонуклеаз, а также фосфатаз.
Условия хранения: -20оС
";s:4:"TYPE";s:4:"HTML";}от 0
ИПТГ (Изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид), свободный от диоксана
ИПТГ (Изопропил-β-D-1-тиогалактопиранозид) - высокостабильный аналог лактозы. Он инактивирует lac-репрессор и индуцирует синтез бета-галактозидазы, фермента, метаболизирующего лактозу. Используется как индуктор экспрессии генов, клонированных под контроль lac-оперона.
Также используется совместно с X-Gal для бело-голубой селекции клонов.
Рекомендуется приготовление стокового раствора в концентрации 100 мМ. Для бело-голубой селекции используется конечная концентрация 0.1 мМ.
Условия хранения: +4оС
от 0
от 0
Полинуклеотидкиназа Anza T4 PNK Kit
от 0
