Реактивы Евроген

Вектор для экспрессии KillerRed в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора, содержит полилинкер (MCS) на 5'- конце кодирующей последовательности KillerRed.

Нуклеотидные последовательности: M13 Forward: 5’-GTTGTAAAACGACGGCCAGTG-3’ М13 Reverse: 5’-AGCGGATAACAATTTCACACAGGA-3’ Стандартные праймеры для ряда векторов, предназначенных для клонирования и секвенирования фрагментов ДНК (серии pUC, pBlueScript, pGEM и им подобные). Могут быть использованы при работе с pAL2-T вектором (кат.# TA002, TAК002). Рекомендованы для ПЦР-скрининга бактериальных колоний и секвенирования клонированного фрагмента ДНК. Рекомендуемая концентрация праймеров в ПЦР 0,2 мкМ каждого в реакционной смеси. Хранение: -20°C. Транспортировка: при комнатной температуре. Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки – 1 год.

Нуклеотидные последовательности: M13 Forward: 5’-GTTGTAAAACGACGGCCAGTG-3’ М13 Reverse: 5’-AGCGGATAACAATTTCACACAGGA-3’ Стандартные праймеры для ряда векторов, предназначенных для клонирования и секвенирования фрагментов ДНК (серии pUC, pBlueScript, pGEM и им подобные). Могут быть использованы при работе с pAL2-T вектором (кат.# TA002, TAК002). Рекомендованы для ПЦР-скрининга бактериальных колоний и секвенирования клонированного фрагмента ДНК. Рекомендуемая концентрация праймеров в ПЦР 0,2 мкМ каждого в реакционной смеси. Хранение: -20°C. Транспортировка: при комнатной температуре. Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки – 1 год.

Водный раствор MgCl2 в концентрации 50мМ. Не содержит ДНКаз и РНКаз. Применение: Раствор MgCl2 предназначен для использования вместе с реакционными ПЦР буферами без магния при необходимости индивидуального подбора концентрации ионов Mg2+ в реакции. Для большинства ПЦР приложений, оптимизацию концентрации ионов магния в реакции рекомендуется проводить в диапазоне от 1.5 до 4 мМ с шагом в 0.5 мМ. Слишком низкая концентрация Mg2+ может приводить к отсутствию целевого ПЦР продукта, слишком высокая – к амплификации неспецифических продуктов ПЦР. Хранение: -20°C. Транспортировка: при комнатной температуре. Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки – 1 год.

Олиго(dT)15 и Random(dN)10 праймеры предназначены для синтеза первой цепи тотальной кДНК на РНК-матрице при помощи MMLV ревертазы (кат.## SK021, SK022S, SK022L). Рекомендуемая концентрация праймеров в реакционной смеси: 1-3 мкМ. Использование случайного Random(dN)10 праймера обеспечивает более высокий выход тотальной кДНК. При этом синтезированные с участием случайного праймера образцы кДНК содержат в 10-30 раз больше рибосомальных последовательностей, чем образцы кДНК, синтезированные с Олиго(dT)15 праймера. Хранение: -20°C. Транспортировка: при комнатной температуре. Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки – 1 год.

Вектор для экспрессии KillerRed, слитого с сигналом локализации на мембране, в клетках млекопитающих под контролем CMV-промотора. Активация KillerRed, локализованного на мембране, приводит к гибели клеток в следствие разрушения липидного слоя.

10X Overnight ligation буфер применяется для стандартного лигирования (14-16 часов при 14°С). Буфер оптимизирован для использования с Quick-TA и T4 ДНК лигазами. Транспортировка и хранение: −20°C. Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год со дня поставки.

pAL2-T вектор предназначен для быстрого клонирования продуктов ПЦР без предварительной обработки рестриктазами или экзонуклеазами. Вектор представляет собой линеаризованную плазмиду с выступающими фосфорилированными 3’- концевыми тимидинами. Эффективное лигирование ПЦР-продукта в pAL2-T вектор основано на способности Таq-полимеразы и ее аналогов нематрично добавлять на 3’-конец синтезированной цепи ДНК дезоксиаденозин. Таким образом, продукт ПЦР и pAL2-T вектор несут выступающие комплементарные 3’-концевые нуклеотиды А:Т. Наличие таких «липких» концов обеспечивает значительно более высокую эффективность лигирования по сравнению с лигированием «втупую». Фасовка содержит лиофилизированный вектор, который необходимо растворить в 25 мкл деионизированной воды (до концентрации 50 нг/мкл). Этого количества достаточно для постановки 25 стандартных реакций лигирования объёмом 10 мкл. Основные свойства pAL2-T вектора: • В 10 раз более высокая эффективность клонирования по сравнению с pAL-TA вектором; • Клонирование продуктов ПЦР в вектор не требует предварительной ферментативной обработки; • Вектор обеспечивает возможность бело-голубой селекции клонов (по результатам ПЦР-скрининга не менее 90% белых колоний содержат рекомбинантную плазмидную ДНК); • Вектор можно использовать для клонирования как индивидуальных ампликонов, так и сложных смесей (например, амплифицированных библиотек кДНК); • Возможен отбор рекомбинантных клонов путем ПЦР-скрининга бактериальных колоний с использованием стандартной пары праймеров; • Растворённый в воде pAL2-T вектор выдерживает не менее 10-15 циклов размораживания/замораживания без снижения эффективности клонирования. Хранение: -20°C Транспортировка: комнатная температура (не более недели) либо -20°C Срок хранения: при соблюдении условий хранения и транспортировки - 1 год.