Обратная транскрипция

Набор предназначен для синтеза двухцепочечной кДНК с РНК- или мРНК-матриц и включает в себя все необходимые компоненты. Синтез 1- и 2-цепочечных кДНК происходит последовательно в одной пробирке и не требует промежуточной органической экстракции или высаживания метанолом. Большинство компонентов реакционной смеси уже смешано, что снижает количество пипетирований.В набор входит обратная транскриптаза Maxima H minus, которая обладает РНК-зависимой и ДНК-зависимой полимеразной активностью, но лишена активности РНКазы Н. Термостабильность обратной транскриптазы Maxima H minus даёт возможность синтеза цепей кДНК до 20 тыс. п.н. в температурном диапазоне от +42 до +65 °С, а высокая эффективность позволяет синтезировать полноразмерные двухцепочечные кДНК за 2 часа. Также в набор включены олиго(дТ)18- и случайный гексамерный праймеры.Набор предназначен для синтеза полноразмерных 2-цепочечных тупоконечных кДНК, а также для конструирования библиотек 2-цепочечных кДНК.

термостабильность – температурный оптимум составляет от +50 до +60 °С, фермент сохраняет активность до 65 °С;

отсутствие РНКазной активности позволяет синтезировать кДНК до 20 тыс. п.н.;

высокая чувствительность и воспроизводимость – стартовое количество РНК может варьировать от 1 пг до 5 мкг;

высокая эффективность – синтез полноразмерных кДНК занимает 15-30 минут;

50-кратная процессивность (по сравнению с ревертазой MMLV) обеспечивает устойчивость к ингибиторам – гуанидину, формамиду, этанолу;

способна встраивать модифицированные нуклеотиды.